自制紫草膏对特异性皮炎的改善作用研究
摘要
关键词
紫草膏;特异性皮炎;炎症因子
正文
特应性皮炎(Atopic Dermatitis, AD),亦称异位性皮炎或湿疹,是一种常见的慢性、复发性、炎症性皮肤病,主要表现为皮肤干燥、剧烈瘙痒、红斑、渗出和结痂等症状[1]。AD的发病机制较为复杂,涉及到遗传、环境、免疫以及皮肤屏障功能障碍等诸多方面因素。流行病学数据显示,AD 不仅是一种皮肤疾病,还可能与多种特应性疾病相关,如过敏性鼻炎、过敏性哮喘、过敏性结膜炎以及食物过敏等,同时可能与肿瘤、克罗恩病、炎症性肠病、1 型糖尿病、类风湿性关节炎等疾病存在关联。此外,AD 患者的心血管疾病及心梗风险可能升高。全球 AD 患病人数约 3.2 亿人,美国和中国分别约有 2600 万和 7000 万患者。中重度患者约占 25 - 30%。近 30 年来,AD 的患病率和发病率呈上升趋势。AD 的儿童患病率为 15% - 20%,成人患病率最高为 10%,是皮肤病中疾病负担最高的一种[2]。
目前,特应性皮炎的发病原因尚未完全明确。现代医学认为[3],其是由多种因素引起的,包括遗传因素、环境因素、免疫系统异常等。病理学特征除免疫失衡外,还有皮肤屏障功能受损的症状,在治疗上一方面提倡在抗炎抗过敏的同时,另一方面利用局部药物增强保湿并控制微生态平衡,促进皮肤屏障恢复。现代医学治疗特应性皮炎的方法主要包括局部药物治疗、光疗、口服抗组胺药等,同时强调对患者的心理支持和生活方式干预的重要性。
中医理论认为[4],特应性皮炎是由于人体内部的阴阳失衡、气血不畅、湿热内蕴等因素引起的,治疗宜内外结合,以外用药直接施于病所的同时用内服药调节整体气机。中医治疗特应性皮炎的方法主要包括中药内服、外用药膏、针灸等,同时强调饮食调理和情志调节的重要性。
紫草作为一种传统中药材,在皮肤护理和治疗方面的作用已被广泛研究[5]。紫草提取物被认为具有舒缓敏感肌肤、减轻炎症和红肿的效果,在护肤领域,因其抗炎、促进愈合和免疫调节的特性而受到重视。研究表明,紫草提取物能够减轻紫外线、化妆品成分刺激、痤疮、接触性皮炎等引发的皮肤炎症,缓解发红、肿胀、发热、疼痛等症状,舒缓敏感肌肤,降低过敏风险和缓解不适感。此外,紫草提取物还具有抗炎、促进皮肤屏障修复、伤口愈合、保湿、美白等功效,在治疗特应性皮炎等皮肤疾病中显示出潜力。本研究通过研制自制紫草膏,探讨其对特异性皮炎小鼠的药效作用及潜在机制。
1.材料
1.1 动物 普通级6周龄BALB/c小鼠48只,质量(20g±2g)。
1.2药物与试剂
1.2.1药物 地奈德乳膏(重庆华邦制药有限公司,国药准字H20060725);自制紫草膏(新疆软紫草、甘草、当归、积雪草等)。 制备过程:将新疆软紫草、甘草、当归、积雪草等浸泡在茶油中1小时以上,然后上蒸锅蒸1小时,得到紫草油。取薄荷精油、凡士林等辅料适量,以水浴热熔,按紫草油:辅料=1∶2 的量加入浓缩液,搅拌直至膏体丝滑无颗粒感,放置合适容器中密封避光保存。
1.2.2 试剂 DNCB(北京百威科技有限公司);丙酮(凯瑞化工);IL-4、IL-6、IgE、TNF-α、TNF-γ ELISA试剂盒(上海科艾博生物技术有限公司)。
1.3 仪器 离心机(艾本德(上海)国际贸易有限公司);Multiskan FC型酶标仪。
2.方法
2.1 动物造模、分组和给药
将48只 BALB/c 小鼠随机平均分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组及自制紫草膏低、中、高剂量组,每组 8 只。小鼠适应性喂养一周后,采用 DNCB 诱发法建立 AD 小鼠模型[6-7]。具体步骤为:实验前一天将所有实验小鼠用剃毛刀进行背部脱毛(暴露皮肤面积为 2 cm×3 cm);实验第一天用 200ul 1% DNCB 溶液(DNCB 固体溶于丙酮 - 橄榄油 3:1混合物)均匀涂抹于小鼠脱毛处,正常对照组小鼠涂抹相同体积丙酮 - 橄榄油混合物,风干后放回笼中,此过程持续三天,第 4 - 7 天不做处理;实验第八天用 0.4% DNCB 溶液均匀涂抹于造模小鼠脱毛处,正常对照组小鼠涂抹相同体积丙酮 - 橄榄油混合物,风干后放回笼中,此过程持续诱发六天。造模结束后,正常对照组、模型对照组涂抹相同体积丙酮 - 橄榄油混合物;阳性对照组涂抹地奈德乳膏;自制紫草膏低、中、高剂量组涂抹相对应剂量的药膏,外用药物 1次/天,给药持续2周。
2.2 小鼠局部皮肤组织评价
2.2.1 皮损评分:每周观察小鼠背部皮损情况,包括红斑、水肿、渗出、结痂等,进行评分,计算皮损的严重程度,每一项指标分为0(无),1(轻度),2(中度),3(重度)分[9]。
2.2.2 小鼠血清学检查
小鼠取血,室温下静置1h后,1500r/min 4℃离心20min,收集血清。ELISA法检测血清中IL-4、IL-6、IgE、TNF-α和TNF-γ 的水平。
2.3统计学分析
采用 SPSS23.0 软件进行统计学分析,以平均值±标准差(x±s)的形式呈现各项实验指标。运用单因素方差分析进行组间差异比较,当 P < 0.05 时,判定为存在统计学意义。
3.结果与分析
3.1对特异性皮炎影响的结果
3.1.1小鼠背部皮损情况
经过治疗,与实验前相比,正常组小鼠的皮肤状况保持稳定,未出现明显变化;而模型组小鼠的背部皮肤则表现出显著的皮损症状,皮肤质地变得粗糙,伴有结痂现象,出现浸润性红斑,且小鼠有不同程度的搔抓行为。相比之下,阳性对照组小鼠的背部皮损有明显减轻的趋势;接受自制紫草膏治疗的中、高剂量组小鼠,其皮损状况相较于模型组也有所改善;不过,低剂量组小鼠的背部皮损虽有一定程度的好转,但与中、高剂量组相比,改善效果仍较为有限。进一步的统计分析显示,模型组小鼠的皮损评分相较于正常组有显著升高(P<0.01),表明造模成功引发了皮损;而阳性对照组以及自制紫草膏中、高剂量组的小鼠,其皮损评分较模型组显著降低(P<0.01),说明这些处理措施对皮损有缓解作用。具体的皮损评分数据详见表1。
表1 治疗后小鼠皮损评分比较
序号 | 组别 | 皮损评分 |
1 | 正常组 | 0.0±0.00 |
2 | 模型组 | 3.2±0.87 |
3 | 阳性对照组 | 1.2±0.22 |
4 | 自制紫草膏低剂量组 | 2.8±0.42 |
5 | 自制紫草膏中剂量组 | 1.5±0.65 |
6 | 自制紫草膏高剂量组 | 1.3±0.47 |
3.1.2血清炎症因子水平检测
采用 ELISA 法检测各组小鼠血清中各类炎症因子的表达水平。与正常组相比较,模型组血清 TNF-α、IgE、IL - 4、IL-6水平升高(P<0.01);与模型组比较,阳性对照组、自制紫草膏中、高剂量组 TNF-α、IgE、IL-4、IL-6水平降低(P<0.01),自制紫草膏低剂量组仅IL-6水平降低(P<0.01)。见表2。
表2 各类血清炎症因子水平比较(`x±s,n=8)
组别 | IFN-γ/ (μg/mL) | TNF-α/ (μg/mL) | IgE/ (μg/mL) | IL-4/ (pg/mL) | IL-6/ (pg/mL) |
正常组 | 89.17±16.3 | 135.97±68.3** | 255.20±98.3** | 78.97±20.1** | 80.51±23.9** |
模型组 | 65.30±59.0 | 378.90±37.3 | 1041.03±235.2 | 143.76±36.5 | 177.77±38.8 |
阳性对照组 | 88.17±18.1 | 153.30±58.2** | 485.90±76.7** | 70.37±8.0* | 95.88±14.0** |
低剂量组 | 70.35±38.9 | 245.30±68.5 | 751.70±112.0 | 100.80±54.7 | 128.91±27.5** |
中剂量组 | 79.45±27.5 | 177.30±66.3** | 458.14±168.7** | 81.87±15.3** | 108.85±12.3** |
高剂量组 | 81.00±13.8 | 165.30±81.0** | 465.80±214.6** | 74.56±45.0** | 98.59±17.8** |
4.讨论
在现代医学中,特应性皮炎的治疗主要包括局部药物治疗、光疗、口服抗组胺药等。此外,现代医学还强调了对患者的心理支持和生活方式干预的重要性。而本研究的结果显示,自制紫草膏作为一种中药制剂,能够有效缓解模型小鼠特异性皮炎的症状、调节免疫平衡,显示出对AD具有显著的治疗作用,这为中医治疗AD提供了有力的证据。
紫草膏的主要成分包括新疆软紫草、甘草、当归、茶油和白凡士林等,这些成分共同作用,有助于舒缓肌肤,减轻炎症,促进皮肤愈合,改善肤色,促进血液循环,舒缓敏感肌肤,减轻炎症和红肿,改善皮肤干燥、粗糙等问题,以及保持皮肤湿润。本研究结果表明,自制新疆软紫草膏对特应性皮炎(AD)小鼠模型具有显著的治疗作用,能够显著改善皮损症状、减轻皮肤炎症,并降低血清IgE水平。这一发现为AD的治疗提供了新的思路和方法。
此外,本研究还发现,自制紫草膏能够显著降低特异性皮炎小鼠的胸腺和脾脏指数,这表明其对小鼠特异性皮炎模型有一定的抑制作用。这一发现进一步证实了紫草膏的免疫调节作用,为AD的免疫治疗提供了新的视角。
综上所述,自制紫草膏对特应性皮炎具有显著的治疗效果,其作用机制可能涉及抗炎、促进皮肤愈合、免疫调节等多个方面。未来的研究可以进一步探讨紫草膏的具体作用机制,以及其在临床治疗AD中的应用潜力。
参考文献
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